CRISPR/Cas是一套最早在细菌中发现的由RNA引导的DNA内切酶系统。

2013年,CRISPR/Cas系统被证实能够在哺乳动物细胞中进行高效基因编辑。

目前,利用来自化脓性链球菌(Streptococcus pyogenes)的CRISPR/Cas9系统进行基因敲除已成为基因功能研究的重要手段。

此外,CRISPR/Cas9系统在新药研发、细胞治疗和生物生产等领域也在发挥越来越重要的作用。

从2013年首次宣布CRISPR/CAS9系统可以应用于哺乳动物开始,CRISPR技术正在基因编辑领域掀起一场新的革命,但在临床转化中仍面临着多样的技术瓶颈挑战:

1.基因编辑效率     2.特异性     3.递送手段为帮助研究者轻松高效地完成细胞基因敲除实验,耐思重磅推出Quick-KO®基因敲除试剂盒。

Quick-KO®基因敲除试剂盒是一款即用型基因敲除试剂盒,针对人、小鼠等的编码基因,采用预设计方案,提供基因敲除实验过程中所需的关键试剂。

试剂盒原理

TracrRNA-crRNA在被融合为单链向导RNA(即sgRNA)时用来指导Cas9作用。针对目的基因,通过人工设计的sgRNA(small guide RNA, sgRNA)来识别目的基因序列,并引导Cas9蛋白酶进行有效切割DNA双链,形成DNA的双链断裂。在通常情况下,细胞会采用高效的非同源末端连接方式(Non-homologous End Joining, NHEJ)对断裂的DNA进行修复。但是,在修复过程中通常会发生碱基插入或缺失的错配现象,造成移码突变,使靶标基因失去功能,从而实现基因敲除。

试剂盒优势

1.即用型试剂、简化操作

NEST 基因敲除试剂盒包含已构建好的表达sgRNA和Cas9的质粒(或慢病毒)及基因型鉴定引物,客户可以直接使用,简单上手。

2.两种标记、灵活选择

NEST 基因敲除试剂盒内含sgRNA带有荧光(mCherry)和药筛(puro)双重标记,用户可以根据需要自行选择。

荧光标记便于使用流式细胞术对转染细胞进行分选,对于使用流式不便的用户,可使用药筛标记,避免流式分选,方便后续实验。

3.节省时间、缩短周期

NEST 基因敲除试剂盒是一款高效的基因编辑产品,在提高实验成功率的同时,缩短了实验的周期、降低经济成本,为后续科研奠定下良好基础。

耐思深耕医疗器械和生命科学领域高品质实验室耗材领域。在生命制药行业中围绕核酸提取与纯化、PCR/RT-PCR、实验室、基因敲除等方面成功构建了完善、成熟的自主产品开发体系,为客户提供一体化解决方案,为全球生命科学领域的研究与发展提供高质工具。

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